( 07-08-2018 - 01:39 PM ) - Lượt xem: 984
NBB®-C Concentrate phát hiện vi sinh vật gây hư hỏng bia không dựa trên sự thay đổi màu sắc. Mẫu sau khi ủ với NBB®-C Concentrate được phân tích dưới kính hiển vi .Giá trị pH 6.4 ± 0.2 & điều kiện ủ ở T°ủ 25°C-28°C trong vòng 5-14 ngày tùy thuộc loại mẫu. Loại mẫu: Yeast-turbid beers, Green beer, Unfiltrate, Wheat beer (95% sample + 5% NBB®-C)
1. NBB®-C Concentrate
Môi trường nuôi cấy lỏng với quá trình làm giàu chọn lọc thông qua sự thêm vào của mẫu men bia đục yeast-cloud beer samples:
- Đơn giản, chỉ cần thêm vào mẫu bia để phân tích.
- Phát hiện vi sinh vật gây hư hỏng bia không dựa trên sự thay đổi màu sắc. Mẫu sau khi ủ với NBB®-C được phân tích dưới kính hiển vi.
Bảng tóm tắt
|
NBB®-C Concentrate
|
Application |
Frequency |
|
Enrichment of turbid beer samples |
Regular (every production cycle) |
|
|
Enrichment of wort samples (sterile beer addition) |
Occational |
|
|
Yeast sampling |
Occational |
1.1 Chuẩn bị chai thủy tinh trong suốt swing top:
Để tạo ra chai vô trùng, cho vào chai 10ml nước deion và cho vào nồi hấp. Không phải bỏ nước này khỏi chai trước khi sử dụng. Lượng nước này có thể để lại trong chai để pha loãng bởi vì nồng độ cao của hoa bia (chứa nhiều hợp chất đắng) của mẫu bia chưa lọc (swing top của chai được làm từ thép không gỉ để tránh sự ăn mòn trong suốt quá trình hấp).
1.1.1 Làm giàu vi khuẩn gây hỏng bia bằng NBB®-C Concentrate trong chai swing top hoặc chai bia :
- Làm giàu trong chia swing top: trong điều kiện làm việc vô trùng, cho mẫu bia cần kiểm tra vào chai thủy tinh vô trùng swing top. Sau đó, thêm vào 5% so với tổng thể tích chai bằng NBB®-CConcentrate. Nếu cần thiết, độ chọn lọc của sự làm giàu có thể được bổ sung bằng việc thêm vào nước (deion) vô trùng. Ví dụ: thêm hơn 25% v/v nước có thể tăng khả năng làm giàu vi khuẩn làm hỏng bia. Chai sẽ được làm đầy bằng nước. Nếu muốn làm giàu vi sinh vật chỉ thị, khoảng trống còn lại trong chai phải được làm đầy với không khí. Đóng náp chai lại, đối với mẫu có chứa men weiss không đóng quá chặt để cho phép khí khuếch tán (nắp có thể đóng chặt sau 3 ngày ủ).
- Làm giàu trong chai bia:Sự làm giàu được thực hiện trực tiếp trong chai bia để test mẫu bia sau lọc. Dùng pipette rút bỏ 5% thể tích bia trong chai và làm đầy chai bia bằng NBB®-CConcentrate. Tương tự, đóng nắp chai và không đóng kín với mẫu có chứa men weiss, dán nhãn chai.
- Điều kiện ủ: Ủ chai với NBB®-CConcentrate khoảng 7-12 days, ở 27 ±2°C trong bình ủ or phòng ủ (sự phát triển men trong thời gian ngắn có thể tạo ra CO2 thay thế sự ủ kỵ khí). Với vi khuẩn phát triển chậm như Lactobacillus Lindneri, thời gian ủ có thể kéo dài thêm.
- Đánh giá kết quả: Độ đục cho thấy sự tăng trưởng của vi khuẩn điển hình làm hư bia , mẫu nên được kiểm tra liên tục trong suốt quá trình ủ. Với mẫu rất đục, kính hiển vi là phương pháp duy nhất đáng tin cậy để xác định sự tăng trưởng của vi khuẩn làm hư bia. Với những mẫu không rõ ràng, có thể làm giàu tiếp tục bằng NBB®-B Broth.
1.1.2 Làm giàu vi khuẩn gây hư hỏng bia từ mẫu hèm bia (wort samples):
- Chuẩn bị chai swing top 200ml với sức chứa khoảng 210ml khi đổ đến đầy miệng chai. Chai có chứa khoảng 20ml nước vô trùng, sau đó thêm vào 50 ml wort và 5% so với tổng thể tích chai NBB®-CConcentrate (khoảng 10ml), cuối cùng làm đầy chai bằng bia thanh trùng khoảng 130ml. Đóng nắp không quá kín để không khí khuếch tán vào.
- Điều kiện ủ: Ủ chai với NBB®-CConcentrate khoảng 7-12 days, ở 27 ±2°C trong bình ủ or phòng ủ (sự phát triển men trong thời gian ngắn có thể tạo ra CO2 thay thế sự ủ kỵ khí). Với vi khuẩn phát triển chậm như Lactobacillus Lindneri, thời gian ủ có thể kéo dài thêm.
- Đánh giá kết quả: Độ đục cho thấy sự tăng trưởng của vi khuẩn điển hình làm hư bia , mẫu nên được kiểm tra liên tục trong suốt quá trình ủ. Với mẫu rất đục, kính hiển vi là phương pháp duy nhất đáng tin cậy để xác định sự tăng trưởng của vi khuẩn làm hư bia. Với những mẫu không rõ ràng, có thể làm giàu tiếp tục bằng NBB®-B Broth.
- Chuẩn bị erlen thủy tinh vô trùng 200ml với nắp đậy cotton vô trùng. Trong điều kiện làm việc vô trùng, rút 10ml mẫu men cần kiểm tra vào erlen, thêm 90 ml bia vô trùng, 5ml NBB®-CConcentrate rồi đậy nắp. Lắc nhẹ để trộn đều.
- Ủ mẫu: Mẫu được lắc chậm trên bể ủ có shaker khoảng 5-12 days ở 27± 2°C .
- Đánh giá kết quả tương tự như 2 trường hợp trước.
1.2 Làm giàu vi khuẩn gây hư hỏng bia từ mẫu men bia (yeast samples):
- Chuẩn bị erlen thủy tinh vô trùng 200ml với nắp đậy cotton vô trùng. Trong điều kiện làm việc vô trùng, rút 10ml mẫu men cần kiểm tra vào erlen, thêm 90 ml bia vô trùng, 5ml NBB®-CConcentrate rồi đậy nắp. Lắc nhẹ để trộn đều.
- Ủ mẫu: Mẫu được lắc chậm trên bể ủ có shaker khoảng 5-12 days ở 27± 2°C .
- Đánh giá kết quả tương tự như 2 trường hợp trước.
